RPMI-1640 com L-Glutamina e Tampão HEPES 25mM sem Bicarbonato de Sódio, Frasco para 1 litro AT060-1L (Himedia)

MARCA: HIMEDIA - MODELO: AT060-1L - PRODUTO: Meio RPMI-1640 Com L-Glutamina e tampão HEPES 25mM, Sem bicarbonato de sódio, para 1 litro

APLICAÇÃO: A meio do Instituto Roswell Park Memorial (RPMI) são uma série de meios desenvolvidos por Moore et al para a cultura de células humanas normais e neoplásicas in vitro. RPMI 1640 é o meio mais utilizado na série. Uma modificação do meio 5A de McCoy, que era especificamente projetado para auxiliar o crescimento de

células linfoblastóides em cultura de suspensão. Atualmente o meio é amplamente utilizado para uma ampla gama de linhagens celulares dependentes de ancoragem. O meio precisa ser suplementado com 5-20% de soro bovino fetal. O o meio também é conhecido por auxiliar o crescimento de células na ausência de soro.

AT060 é meio RPMI-1640 modificado suplementado com tampão HEPES 25 mM e L-glutamina. HEPES, um buffer zwitteriônico com pKa de 7,3 a 37ºC impede o aumento inicial do pH que tende a ocorrer no início de uma cultura e aumenta a capacidade de tamponamento do meio. Os usuários são aconselhados a revisar a literatura para recomendações em relação à suplementação dos meios e requisitos de crescimento fisiológico específico para diferentes linhas celulares.

COMPOSIÇÃO:

Ingredientes mg/L

SAIS INORGÂNICOS

Nitrato de cálcio tetrahidratado: 100.000

Sulfato de magnésio anidro: 48,840

Cloreto de potássio: 400.000

Cloreto de sódio: 6000.000

Fosfato de sódio dibásico anidro: 800.000

AMINOÁCIDOS

Glicina: 10.000

Cloridrato de L-Arginina: 241.000

L-Asparagina 50.000

Ácido L-aspártico 20.000

Dicloridrato de L-cistina 65.200

Ácido L-glutâmico 20.000

L-Glutamina: 300.000

Cloridrato de L-histidina: 20.960

L-hidroxiprolina: 20.000

L-isoleucina: 50.000

L-Leucina: 50.000

Cloridrato de L-Lisina: 40.000

L-Metionina: 15.000

L-fenilalanina: 15.000

L-Prolina: 20.000

L-Serina: 30.000

L-Treonina: 20.000

L-triptofano: 5.000

L-tirosina sal sódico: 28.830

L-Valina: 20.000

VITAMINAS

Cloreto de colina: 3.000

D-Biotina: 0,200

D-Ca-Pantotenato: 0,250

Ácido Fólico: 1.000

Niacinamida: 1.000

Cloridrato de piridoxina: 1.000

Riboflavina: 0,200

Cloridrato de Tiamina: 1.000

Vitamina B12: 0,005

i-inositol: 35.000

Ácido p-aminobenzóico (PABA): 1.000

OUTRAS

D-Glucose: 2000.000

Glutationa reduzida: 1.000

Tampão HEPES: 5958.000

Vermelho fenol Sal sódico: 5.300

INSTRUÇÃO DE USO:

1. Suspender 16.4g em 900mL de água de grau de cultura de tecidos com agitação constante e suave até que o pó esteja completamente dissolvido. Não aqueça a água.

2. Adicione 2,0 g de pó de bicarbonato de sódio (TC230) ou 26,67ml de solução de bicarbonato de sódio a 7,5% (TCL013) para 1 litro de meio e mexa até dissolver.

3. Ajuste o pH para 0,2-0,3 unidades de pH abaixo do pH desejado usando 1N HCl ou 1N NaOH desde o pH tende a subir durante filtração.

4. Ajuste o volume final para 1000mL com água grau cultura de tecidos.

5. Esterilize o meio imediatamente filtrando através de um filtro de membrana estéril com uma porosidade de 0,22 mícron ou menos, usando pressão positiva em vez de vácuo para minimizar a perda de dióxido de carbono.

6. Adicione assepticamente suplementos estéreis conforme necessário e dispensar a quantidade desejada de meio estéril em recipiente estéreis.

7. Armazene o meio líquido entre 2-8 ° C e no escuro até o uso.

CONTROLE DE QUALIDADE:

Aparência: Pó homogêneo esbranquiçado a branco cremoso.

Solubilidade: Solução límpida a 16,4 g/l.

pH sem bicarbonato de sódio: 6,40 – 7,00

pH com bicarbonato de sódio: 6,70 – 7,30

Osmolaridade sem bicarbonato de sódio: 280,00 -320,00

Osmolaridade com bicarbonato de sódio: 320,00 -360,00

Resposta da Cultura: A capacidade de promoção do crescimento do meio é avaliada qualitativamente, analisando as células para a morfologia e quantitativamente estimando as contagens de células e comparando-as com um meio de controle através de um mínimo de três subculturas.

Conteúdo de endotoxina: NMT 5EU/mL

REGISTRO ANVISA: Produto considerado não correlato na ANVISA.

ARMAZENAMENTO: Armazene de 2-8°C longe da luz. Prazo de validade de 12 meses da data de fabricação. Use antes da data de expiração.

APRESENTAÇÃO / EMBALAGEM: pó para preparar 1 litro de meio.