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O Kit ProtoScript II de Síntese de cDNA apresenta duas misturas otimizadas, a Mistura de Enzima ProtoScript II e a Mistura de Reação ProtoScript II. A mistura de enzimas combina a Transcriptase Reversa ProtoScript II e o Inibidor de RNase de Murino, enquanto a mistura de reação contém dNTPs e um buffer otimizado. A Transcriptase Reversa ProtoScript II é uma transcriptase reversa M-MuLV recombinante com atividade reduzida de RNase H e termoestabilidade aumentada. Pode ser utilizado para sintetizar cDNA de primeira cadeia a temperaturas mais elevadas do que o M-MuLV de tipo selvagem. A enzima é ativa até 48°C, proporcionando maior especificidade e maior rendimento de cDNA.
O kit também fornece dois primers otimizados para transcrição reversa e água livre de nuclease. Um primer oligo-dT ancorado [d (T) 23VN] obriga o primer a recozer para o início da cauda poliA. A mistura otimizada de primers aleatórios fornece locais de priming randômicos e consistentes cobrindo os templates de RNA completos, incluindo tanto mRNAs como RNAs não poliadenilados. O produto de primeira cadeia de cDNA gerado é de até 10 kb.
Componentes do Kit:
- Água livre de Nuclease
- Mix de reação ProtoScript® II 2X
- Mix de enzimas ProtoScript® II 10X
- Oligo d(T)23 VN 50 μM
- Mix de Primer 60 μM
Temperatura de transporte e armazenamento: -20°C
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